Study of Innate and Adaptive Immune Mechanisms of Resistance or Susceptibility to Experimental Neospora caninum Infection
Actualizado em Terça, 15 Fevereiro 2011 14:37 Terça, 15 Fevereiro 2011 14:33
"Study of Innate and Adaptive Immune Mechanisms of Resistance or Susceptibility to Experimental Neospora caninum Infection"
Sofia Botelho, PhD
(Grupo de Biologia Molecular e Celular, CICS/ISCS-N)
Seminários CICS 2011
Sala H - Edif. IV - 12h00 - 18 de Fevereiro
(Anfitriã: Elsa Cardoso, GBMC/CICS/ISCS-N)
Resumo:
Neospora caninum é um parasita coccídeo, que enquista e causa infecções clínicas globalmente designadas por neosporose num elevado número de hospedeiros animais em todo o mundo. A neosporose é reconhecida como a principal causa de abortos em bovinos em todo o mundo com um importante impacto negativo na indústria leiteira. Até ao momento, não estão disponíveis agentes terapêuticos ou vacinas que eficazmente previnam ou tratem a neosporose. Deste modo, um melhor conhecimento da resposta imune do hospedeiro ao parasita será certamente relevante no desenvolvimento de novos agentes terapêuticos ou profiláticos ajudando no controlo desta doença.
No sentido de contribuir nesta tarefa, foram estudados neste trabalho os mecanismos imunes inatos e adaptativos induzidos pelo hospedeiro após infecção por N. caninum, usando o modelo murino uma vez que estes apresentam muitas características imunopatológicas semelhantes a hospedeiros infectados naturalmente. Posteriormente, estudamos alguns dos mecanismos implicados nas respostas imunes inatas e adquiridas provocadas no hospedeiro após infecção por N. caninum, utilizando o modelo murino.
As etapas iniciais de infecção são de extrema importância na determinação da resposta imune do hospedeiro. Esta envolve normalmente a activação ou o recrutamento de células da imunidade inata como células dendríticas (DCs), macrófagos ou neutrófilos. Por conseguinte, e dado que este tópico tem sido pouco abordado no estudo da neosporose, decidimos estudar o papel dos macrófagos e DCs na resposta imune em ratinhos BALB/c infectados, por via intraperitoneal com o parasita, durante as primeiras etapas da infecção. Os resultados obtidos demonstram que, tanto as DCs convencionais (cDCs) como as plasmacitóides (pDCs) expressam marcadores de activação e produzem IL-12, 12h após infecção com N. caninum. Além disso, a produção de IL-10 nos ratinhos infectados foi detectada durante as etapas iniciais após infecção. Demonstramos que os macrófagos produziam esta citocina quando infectados in vitro com o parasita, sendo deste modo provável o seu envolvimento na produção de IL-10 in vivo. A produção precoce desta citocina imunosupressora poderá ser importante no estabelecimento da infecção por N. caninum no hospedeiro.
A resposta imune mediada por linfócitos foi estudada num novo modelo murino de infecção por N. caninum estabelecida através do aparelho gastrointestinal, num estudo comparativo no qual ratinhos infectados com o parasita pela via intraperitoneal foram também analisados. Em ratinhos infectados com N. caninum, por cada uma das vias de infecção referidas, foi detectada a presença de anticorpos IgA específicos para o parasita no lúmen intestinal e ainda elevados níveis de expressão de mRNA para o IFN-γ nas placas de Peyer (PP). Apesar de em estudos prévios ter sido demonstrada que a produção sistémica de anticorpos era irrelevante para a resposta imune protectora do hospedeiro sob um ambiente TH2, evidências apresentadas neste trabalho indicam que um papel protector das células B pode envolver a ajuda a células T no contexto da formação do centro germinativo. Além disso, a expansão de células T reguladoras foi observada nos animais infectados, pela primeira vez, no contexto da neosporose.
Neste trabalho foi também estabelecido que os ratinhos C57BL/10ScCr, que não têm um receptor funcional para a IL-12, são altamente susceptíveis à infecção por N. caninum. Estes resultados confirmam e reforçam trabalhos efectuados por vários investigadores, indicando que a IL-12 e o IFN-γ desempenham um papel fundamental na resistência do hospedeiro à infecção por N. caninum. Este modelo murino altamente susceptível foi usado em conjunto com ratinhos deficientes em células T citotóxicas (CD8+) de forma a avaliar o papel protector das células T CD8+ à neosporose. Demonstramos que ratinhos deficientes em células T CD8+ são mais susceptíveis à infecção por N. caninum do que ratinhos da estirpe selvagem (WT) infectados. Nos ratinhos WT infectados, o número de células T CD8+ apresentando marcadores de activação à superfície era maior em comparação com os ratinhos controlo. Dada a possível intervenção dos linfócitos T CD8+ na resposta imune protectora à infecção por N. caninum, células T CD8+ purificadas de ratinhos imunocompetentes C57BL/10ScSn, resistentes à infecção, infectados por N. caninum, foram adoptivamente transferidas para ratinhos C57BL/10ScCr naïve, estes foram subsequentemente infectados com um inóculo letal de N. caninum. Estes ratinhos que receberam células T CD8+ de dadores infectados apresentaram um prolongamento no tempo de sobrevida, em comparação com os controlos. Deste modo, foi demonstrado um papel protector das células T CD8+ à neosporose, em ratinhos.